--细 胞 基 本 信 息---

体细胞品牌： Kasumi-1(人慢性原粒体細胞儿童白血病体細胞)

人体细胞又称： Kasumi-1; Kasumi 1; KASUMI1; Kasumi1

血细胞货号： SNL-339

产生基本特性： 飘浮

培训水平： 1640+20% FBS+1% P/S

致力于场景： 热空气，95%； 二氧化物碳 (CO2)，5%；37℃

生殖细胞概述： Kasumi-1血组织上皮神经元系从想当亚太地区男性朋友慢性髓系癌症病患者的外周血中离出的成髓血组织上皮神经元系，髓过氧化反应物酶呈阳性，展示其髓性发育稳定的形态特征。Kasumi-1血组织上皮神经元系都是个中带8：26号固色体转位的癌症血组织上皮神经元系株，这款转位令AML1染色体和ETO(或称MTG8)染色体串连，使深度融合染色体AML1-ETO(也号称AML1-MTG或RUNX1-CBF2T1)的描述变高，然而血组织上皮神经元系发生嵌合的AML1-ETO核淀粉酶，这款核淀粉酶上涨CEBPA mRNA、核淀粉酶和DNA的运用活性氧，而在这种运用对粒性白血组织上皮神经元系的多样性是极duan很重要的。Kasumi-1血组织上皮神经元系繁殖实验报告展示，锻炼的Kasumi-1血组织上皮神经元系对IL-3、IL-6、G-CSF(粒血组织上皮神经元系集落激起要素)、GM-CSF(粒血组织上皮神经元系-巨噬血组织上皮神经元系集落激起要素)有崩溃，但对IL-1和IL-5无崩溃。在身体固体锻炼中别ဣ申请参加二甲亚砜、G-CSF、IL-5，也无检查到粒性或嗜含酸性血组织上皮神经元系的发育稳定。Kasumi-1血组织上皮神经元系锻炼工作中，申请参加佛波酯应该诱骗出的巨噬血组织上皮神经元系样血组织上皮神经元系。Kasumi-1血组织上皮神经元系应该用以3D血组织上皮神经元系锻炼、细胞天然免疫性系统性不正常学习、细胞天然免疫性学学习。

组织细胞普通 生長型态美图照片

Kasumi-1组织的培养特别留意问题

l Kasumi-1血细胞呈悬屏正方形发育期或聚团发育期。

l 半圆形晶莹、生殖受损内部系系🃏完成的生殖受损内部系系是活生殖受损内部系系，假如没有来判断，可能取多量生殖受损内部系系用台盼蓝刺绣后计数法制定🧸生殖受损内部系系活率。

l 打疫苗导热系数推荐 在50万组织/mL左右两为宜，比🗹热容过低或过高都可以引致组织感觉不佳；培养出至80万组织/mL比热容时就可以传代，推送传代此例1：2。

l 的培养时存在的部位细胞系杂物是平常症状，꧃ 若勾玉相当多，也可以待上皮细胞高密度比较大时利用高转速离心分离（900rpm，3min）清掉这部分魂晶； 若魂晶不够多，💃则需特出处理；神经元溶解度低时不想离心法法去魂晶，大概等神经元增值能力到都可以传代🔜的溶解度再离心法法。

l Kasumi-1生殖细胞繁殖线速度缓慢，需包容心锻炼。锻炼制度中血清分子量为20%，不提案💝大大减少血清比例怎么算。繁💫殖环境恢复相对稳定，少了解，少操控。

l 当人体神经元情况比较时，不最好是对人体神经元进🧔行离心法，需换液时可按照半换液法（具体步凑见发文）。

l Kasumi-1组织癌细胞系冻存的难度相对较大，比较适合 施用高血清百分比冻存液成分冻存组织癌细胞系，冻存比热容不容过低，比较适合200-2ꦗ00万组织癌细胞系/mL/管，以增长新生儿复苏活率。

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Kasumi-1肿瘤细胞换液技巧

l 半换液法：

1. 提供必备的提升基、抽滤管和无菌室枪头等；（提升基提前较长的♔时间来准确💖的预警出地震的发生打火）

2. 将培植瓶竖放静置10min，待人体组织沉底；（人的眼睛关注人体组织沉底情况下）

3. 留意吸出成功一半了 的培养出基，转到到离心力管；

4.♚ 900-1000rp💫m 3min离心法分离，离心法分离管里若有癌细胞，则用鲜新训练基重悬后放回原瓶；

5. 原瓶补足就不的剥好锻炼基，混匀组织，放在训练出箱中仍然训练出。

l 离心分离换液法：

1. 筹备 的需求的养育基、抽滤管及没有细菌枪头等；（养育基提早提前预热）

2. 将各个细胞核悬液转入至抽滤管上；

3. 900-1000rpm，3min离心力；

4. 培养教育计划瓶里加入通常生鲜培养教育计划基；（T25介绍10mL，T75介绍20mL）

5. 离心法做好后弃𝐆上清，加少量鲜新塑造基轻重轻悬细胞膜系析出，将细胞膜系悬液疫苗接种回培養瓶中，混匀癌细胞，倒进锻炼箱中仍在锻炼。

Kasumi-1细胞膜传代方式方法

l 离心分离法：

1🃏.取一定量細胞悬液敲定运算敲定細胞溶解度，溶解度80万/🌺mL大于传代，并表明运算结果显示敲定传代的比例；

2.前提准备所须的提升基、抽滤管和没有细菌枪头等；（提升基前提升温）

3.用移液器提炼培養瓶内肿瘤细胞悬液传递至离心分离分液漏斗；

4.900-1000rpm，3min离心式收集整理细胞核；

5.在激发瓶添加入适度最新鲜激发基；（T25推薦10mL，T75推薦20mL）

6.离心力法达成后，弃离心力法管道内上清，但是加盟掺入鲜活致力于基，轻深浅悬吹散生殖肿瘤肿瘤细胞🎉，将生𒈔殖肿瘤肿瘤细胞悬液粗糙疫苗注射至致力于瓶中，轻轻地混匀后将生殖肿瘤肿瘤细胞放进致力于箱中再继续致力于。

Tips：浮动神经細胞平常都偏脆，特💫别注意调节吹打力道尽机会轻细腻离心式钻速和事件不用过高，制止神经細胞受机诫损害。

l 之间分瓶法：

1. 取🍰几瓶体血细胞悬液使用运算明确体血细胞高导热系数，高导热系数80万/mL往上传代，并只能根据计算然而断定传代比例图；

2. 缓缓左右摇摆的培养瓶，使细胞膜不匀分散型；

3. 用移液器吸走训练瓶内血细胞膜悬液，均分钱很多个新训练瓶中，每瓶再摄入适量的的新颖训练🐓基，轻柔地混匀后将血细♍胞膜复制到训练箱中仍在训练。

Kasumi-1细胞系冻存技术

1. 取一少部分神经元系悬液使用计数器认定神经元系黏度。

Tips：若冻꧟𝔍存前培育出来基以经变黄，先换液静置培育出来4h左右两边，待生殖细胞力量稳定性高后再展开冻存。

2. 备考要求的教育培养液、PBS、血清、DMSO、离心力管和无菌检测枪头等；（制剂需提前就点火）

3. 跟🎉据获得到細胞量，配好的凉茶合适量的冻存液，并开始准备合适数量统计的冻存管，在冻存管上标识細胞标题，代次，冻存的时间等数据信息。推介冻存液配方法：92%FBS+8%DMSO或92%完quan培训基+8%DMSO；冻存导热系数200-三꧅百万细胞系/mL/管。

Tips：冻存孔隙率过低将形成新生儿复苏后的情况不佳。

4. 将细胞核悬液更改至离心力分液漏斗1000rpm，3min抽滤收录受损细胞；

5. 离心分离进行后弃上清🃏，成为相对应量的设备好的冻存液轻深浅悬混匀人体细胞系，将人体细胞系悬液散装至冻存管内。要注意吹打力量，要产生了过𓆏高汽泡；

Tips：加盟冻存液混匀人体肿瘤细胞核后适时散装ౠ并将人体肿瘤细胞核变凉冻存，以削减DꦏMSO对人体肿瘤细胞核的致毒。

6. 将细胞核储放程序流程降低温度冻存盒中，再将冻存盒转让至-80℃墙上实行下降冻存。

7. 隔日溶栓一管检测冻存效率，核实没事情后即时将冻存血受损细胞搭建液氮中存为，血受损细胞在-80℃冷♌柜摆放在日子无需超3天。

Kasumi-1癌细胞恢复工艺

1. 尽早将水浴锅提前预热至37℃，培养出来基复温至常温或37℃，离心分离机放置消退速；

2. 将冻存神经细胞从液氮或-8𓆉0℃冰箱保鲜中拿出来，很快放🔯置到37℃水浴，很快幌动至完quan溶解，溶解时1min范围；

3. 真接将冻存管900-1000rpm 2min离心法，此外在提升瓶中放入只要不过量新鲜的提升基；

4. 离心力完整后弃上清，吸取教训1mL新鲜感养育基轻深浅悬内部，吹散内部后接种疫苗到养育瓶中；

5. 适用十字法或8字法将受损细胞混匀后放入教育教育培养箱中教育教育培养。

Tips：

1. 若液氮或冷藏柜距里内部房比较远，内部都要摆在干冰或冰盒上运往至内部房。

2. 肿瘤细胞溶解后需更好地离心法删去DMSO。

3. 所有肿瘤细胞新生儿复苏具体步骤在尽有机会5-10min内来完成。

Kasumi-1上皮细胞到货全攻略

1. 拆封设计盒，根本生殖細胞，阐明书等有无是非常齐全，收获ꦇ生殖細胞名与所够买生殖細胞有无是具备；

2.🌱 观察动物神经细胞激发瓶💜有没有没有问题，有没有漏液，激发瓶内激发基有没有有眼睛由此可见的絮状物或者是发浑等，出现 失败适时拍摄照片建立联系销售员师；

3. 确保一样常后，将养成出瓶表层消毒杀菌，再撕掉封好膜竖放⛄复制到养成出箱稳定4🤪h时间，让飘浮细胞核沉下来激发瓶下端；

4. 均衡的时候中也可以细细阅读书组织情况产品说明，知悉♛组织所需要的锻炼机🤪制，锻炼学习环境还有锻炼需注意事由等；

5. 和平做好后竖起取掉体细胞系致💟力于瓶，在此大区域体细胞系沉在致力于瓶底层，安全教案小班吸取教训上清至离心力分液漏斗，补齐10mL之间教育养育基的配制在教育养🉐育瓶内，谨慎进行操作，尽可能的不可以吸到沉在底端的癌细胞；

6. 将离心力管1200rpm，5min离心式持续未沉得致力于瓶底下的组织内部，上清就能够4℃另🐼存，下一步使用于致力于组织内部，以平静过早到自个儿的致力于基。将持续到的组织内部注射至原致力于瓶；

7. 轻柔地混匀肿瘤细胞，取100-200ul体神经元悬💯液做出筛选法，随着筛选法但是调低体神经元培育计划导热系数。第二置放培育计划箱中培育ಌ计划。

常见到方面及缓解方案设计

体细胞比热容这么计算公式的？

严格要求功用上，血血血細胞系核比热容必须 收集整理血血血細胞系核悬液运算器血血血細胞系核數量统计，但在实际效果养成进程中，并不必须 为了让精密掌握血血血細胞系核數量统计而运算器。于是，常常用的血血血細胞系核比热容指血血血細胞系核相对性于最大程度的生长期比热容的比率，贴壁血血血細胞系核需要简略的用血血血細胞系核所占养成♏金属罐基材积比例说道，即显微镜了解下了解养成金属罐底层，有血血血細胞系核的区占总区的比例率，当此类展现策略异常于单一个血血血細胞系核的生长期与众不同的比热容出现占空间与众不同的造成的并不认真细致，但也是非常的主观、简单便捷的展示血血血細胞系核状况的某种策略。

NO.2养育期间中细胞膜杂物较多咋个整理？

1. 血细胞内的咖啡色颗粒剂是生殖細胞外排泌泡及生殖細胞器折光，此是指生殖細胞自我的特点，不可能快速清理也不可能调整，大有些生殖細胞都能有这样的表现，但是的🥂不同生殖細胞颗粒肥料肥料很多有有什么区别吗，生殖細胞培养教育计划标准不是应、营养素较弱、覆盖压十分等均可能导致生殖細胞内颗粒肥料肥料延长，意见与建议用到靠谱的培养教育计划前提。

2. 人体细胞外的藏青色颗粒肥料大那部分是上皮细胞系魂晶和上皮细胞系新陈代谢有机物，可依据900-1000rpm，3min离心分离分离以祛除位置觉醒石。小量觉醒石不作用受损细胞🐬发展，不建意多离心分离分离。

服务安利：

【SNL-339】 Kasumi-1(人突然原粒组织癌症组织)

【SNLM-339】Kasumi-1人体细胞专业完quan培训基